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HI實驗操作注意事項
時間:2021-03-01   來源:林希   作者:華南生物

        HI實驗在臨床工作中應用廣泛,結果判定快速,操作方法簡單實用。但可能受一些因素影響,使得試驗結果不準確,從而無法指導生產,因此對在實際操作中有可能出現的誤差進行分析。

        1. 4單位抗原的配制

病毒的血凝價需準確,現用現配,在抗體測定前做回歸試驗。

        2.抗原

新抗原分裝后保存,分批使用,可以減少反復凍融效價降低,加4單位抗原時必須邊加邊混勻。

        3.稀釋液

        根據《高致病性禽流感診斷技術》GB/TI8936-2003進行PBS配制,pH為7.0時, 紅細胞沉降效果最佳。

        4.被檢血清

        理想的被檢血清是淡黃色液體,無污染、無雜質、無腐敗變性、無溶血、無膠凍樣的物質。

        5. 1%紅細胞懸液

        離心時間過長,轉速過快導致紅細胞破裂,引起溶血。紅細胞離心后粘稠度高,可采用反向移液法配制以確保足夠的紅細胞量,避免出現跳孔。濃度過高,沉降點過大,血凝抑制價上升,濃度過低,沉降點過小,血凝抑制價下降。同一批次的血清樣品不宜更換不同批次的紅細胞,邊加邊混勻。從最后一孔開始加紅細胞,滴頭避免接觸孔內液體,影響結果。

        6. 其它因素

        6.1 器材

        96 孔V型板比U型板的實驗結果判定更準確。吸頭一次性使用,及時更換可避免污染。使用微量移液器速度不宜過快,加樣時懸滴。稀釋樣品不宜產生氣泡,吸頭不宜緊貼孔底,注意慢吸快打,吸頭內不留液體。振蕩器振蕩時間不宜太長或強度太大,避免紅細胞破裂。

        6.2實驗室環境溫度

溫度過高,時間過長,結果出現快,使整板無凝集現象,使得結果誤判。

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